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■ 产品简介

零背景ZT4-Blunt克隆试剂盒是专门对平滑末端DNA片段或PCR扩增产物进行高效克隆的一种阳性筛选系统。该克隆载体包含一个致死基因，当目的DNA片段插入克隆位点时,该致死基因被破坏，故仅带插入目的片段的克隆才能生长形成白色菌落，无需加入IPTG及X-Gal进行蓝白斑筛选；克隆阳性率超过95%。

■ 产品亮点

·可5min快速连接，且克隆效率超过95%

·无需IPTG及X-Gal进行蓝白斑筛选

·PCR扩增产物无需磷酸化

·酶切产物无需去磷酸化

·专用于平滑末端DNA片段或PCR扩增产物

·特别适合Pfu、KOD等系列产物的克隆

1.制备片段

	★平端片段（Pfu、KOD等扩增产物）
	★片段浓度最低可至5ng/μL

2.与载体混合加入连接酶

	★实现5min快连
	★最长可连接10kb片段（即使5kb片段，也已超过95%的阳性率）
	★载体稳定性极高，反复冻融影响极低

3.转化

	★采用先进的自杀基因筛选技术无需繁琐蓝白斑筛选，阳性克隆率接近100%

■ 菌落PCR

■ 储存

-20℃下至少保存1年。

■ ZT4-Blunt载体测序引物序列

Forward Sequencing Primer，20-mer：5’-TAATACGACTCACTATAGGG-3’

Reverse Sequencing Primer，24-mer：5’-AAGAACATCGATTTTCCATGGCAG-3’

■ ZT4-Blunt载体图谱

■ ZT4-Blunt载体多克隆位点序列