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一般PCR法具有一定的局限性,特别是难以扩增5 kbp以上的长链DNA,这严重限制了PCR法的推广和应用。通过改变PCR用DNA聚合酶、PCR用Buffer、PCR扩增条件等,使长链DNA的扩增成为可能,这就是LA(Long and Accurate)PCR技术。本试剂盒所用的LA Taq 是Taq聚合酶和有校正功能的聚合酶的混合酶,这种混合酶可以染色体和其它细胞器的DNA为模板高效进行PCR反应。在人的染色体上可以扩增长度可达27 kb的DNA片段,而以λDNA为模板则可以扩增出高达40 kb的片段。本制品是2×LATaq MasterMix,使用方便,减少了试验操作过程的污染。
■ 适用范围
适合于高保真的长片段及一些复杂模板(如含二级结构,富含GC序列和重复序列等)的扩增,如构建基因图谱、测序及分子遗传学研究等。
■ 产品内容(2×)
·Long Taq DNA Polymerase (recombinant):0.05units/µl
·MgCl2: 4mM
·dNTPs (dATP, dCTP, dGTP, dTTP):0.4mM
■ 质量控制
经检测无外源核酸酶活性;PCR方法检测无宿主残余 DNA ;能有效地扩增人基因中的单拷贝基因;室温存放一周,无明显活性改变。