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本试剂盒用碱裂解法从培养菌中提取质粒DNA,采用独特的溶液配方和内毒素清除试剂,只需要几次简单离心去除蛋白质、多糖、内毒素、RNA等杂质,获得高质量的质粒DNA。纯化DNA的OD260/280通常在1.8左右,得到的质粒可直接应用于细胞转染甚至动物体内实验等对DNA纯度要求很高的工作中。纯化后期过程均在Eppendorf管中操作,方法简单,不需特殊设备,无需过柱,不用酚氯仿抽提;基本可完全回收细菌裂解释放出的质粒,不必担心质粒DNA的丢失。本方法提取纯化质粒DNA,对质粒损伤小,即使是10kb甚至100kb以上的大型质粒或超大型BAC/PAC质粒,只要碱裂解法能够提取,就可以有效纯化。
■ 产品特点
1. 不需要使用有毒的苯酚,氯仿等试剂,也不需要乙醇沉淀。快速、 方便、从100-140 ml大肠杆菌LB((Luria-Bertani)培养液中,可快速提取0.2-0.5mg纯净的高拷贝质粒DNA,提取率达80-90 %。
2. 获得的质粒产量高,超螺旋比例高,纯度好,可直接用于酶切、转化、PCR、体外转录、测序等各种分子生物学实验。
3. 内毒素含量可低至1.5 EU/μg DNA,可直接应用于细胞转染。
■ 储存条件
第一次使用前将RNase A加入溶液1中,混匀后置于2-8℃保存,可稳定保存一年以上。内毒素清除剂在4℃可保存一个月,如果要长期保存,建议保存在-20℃!本试剂盒在室温(15-25℃)干燥条件下,可保存1年;更长时间的保存可置于2-8℃。2-8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,应在使用前置于 37℃下溶解沉淀。单独包装的RNaseA 在-20℃可稳定保存1年以上。