Bradford蛋白浓度测定试剂盒

产品简介：

本公司生产的bradford蛋白浓度测定试剂盒是根据目前广泛应用的蛋白浓度检测方法之一bradford法研制而成。其操作简单，灵敏度高，检测速度极快。可检测浓度下限达25μg/ml的蛋白样品，最小检测蛋白量达到0.5μg，待测样品体积为1-20μl。

包装内容：

保存条件：

G250染色液4℃保存，蛋白标准液-20℃冻存。有效期半年。

操作说明：

1.取1ml蛋白标准配置液加入到25mgBSA的蛋白标准管中，完全溶解蛋白标准品，即为25mg/ml的蛋白标准溶液。配制成的蛋白标准溶液可-20℃长期保存。

2.取适量25mg/ml蛋白标准溶液，稀释至终浓度为0.5mg/ml。标准品最好与蛋白样品用同样的溶液稀释。但为了简便起见，通常使用0.9%NaCl或PBS稀释标准品。

3.做标准曲线。将标准品按0, 1, 2, 4, 8, 12, 16, 20μl加到96孔板中，不足20μl的加标准品稀释液补足到20μl。

4.将待测的蛋白样品稀释至合适浓度，加到96孔板中，使待测样品总体积也为20μl。

5.每孔加入G250染色液200μl，充分混匀（可将酶标板放在振荡器上振荡30s），室温放置3-5min后，以标准曲线0号做参比，在 595nm波长下比色测定，记录各孔吸光度值。以标准品蛋白含量（μg）为横坐标，吸光值为纵坐标，绘出标准曲线。根据所测样品的吸光值，在标准曲线上即可查得相应的蛋白含量（μg），除以样品稀释液总体积（20μl），乘以样品稀释倍数即为样品实际浓度。

6.如用分光光度计测定，请在第三步的时候将标准品体积改为1ml，浓度梯度用生理盐水稀释为0,1,2,5,10,15,30μg/ml。或根据样品调整浓度梯度。

7.将样品稀释至合适浓度，加到小试管中，使待测样品总体积也为1ml。

8.每只试管加G250染液3ml，充分混匀，室温放置3-5min后，以标准曲线0号做参比，在 595nm波长下比色测定，记录各孔吸光度值。

注意事项：

1.   1.   G250染色液使用前请颠倒3-5次，混匀。

  2.   蛋白标准请在全部溶解后先混匀，再稀释成一系列不同浓度的蛋白标准。

  3.   将G250染色液回复到室温再使用，有利于提高检测的灵敏度。

  4.   Bradford法测定蛋白浓度不受绝大部分样品中的化学物质的影响。样品中β-巯基乙醇的浓度

       可高达1M，二硫苏糖醇的浓度可高达5mM。但受略高浓度的去垢剂影响。

       需确保SDS低于0.01%，Triton X-100低于0.05%，Tween 20,60,80低于0.015%。

       含去垢剂的样品推荐使用本公司生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒。