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产品简介:
蛋白酶K是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶,从布氏白僵菌(Beauveria bassiana)中纯化得到,用于生物样品中蛋白质的一般降解。该酶有两个ca2+结合位点,它们离酶的活性中心有一定距离,与催化机理并无直接关系。然而,如果从该酶中除去ca2+,由于出现远程的结构变化,催化活性将丧失80%左右,但其剩余活性通常已足以降解在一般情况下污染酸制品的蛋白质。蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。在较广的pH范围内(pH 4-12.5)均有活性,在尿素和SDS中也较为稳定,还具有降解天然蛋白质的能力。
产品参数:
比活性值:38 U/mg蛋白
来源种属:布氏白僵菌(Beauveria brongniartii)
分子质量:28 KDa
产品性状:固体酶为白色冻干粉
纯 度:≥95%(SDS-PAGE)
稀释缓冲液:
根据需要,利用20mM Tris-HCL 缓冲液(PH 7.5)溶解成20mg/ml的工作浓度。
酶稳定性测定(—20℃冷冻条件下,12个月的数据)
结果:干粉状态正确储存,一年内酶活性保持不变;溶解状态酶活性一年内降低小于2%。
抑制剂
蛋白酶K是一种丝氨酸蛋白酶,因此可以用苯甲基磺酰氟抑制其作用,苯甲基磺酰氟是一种丝氨酸蛋白酶的抑制剂。在纯化蛋白质时用于防止蛋白质的降解。
应用范围
蛋白酶K的用途广泛,主要的应用行业包括:医疗及基础研究领域:基因诊断试剂盒;基因组DNA提取试剂盒、RNA提取试剂盒中去除DNA和RNA制备中的核酸酶;此外,还应用于:皮革工业(皮革软化及精细化、脱毛和软化、蚕丝脱胶)制备脉冲电泳的染色体DNA;提取组织中非蛋白成分时,降解含有蛋白质杂质;食品、酿造工业:肉类嫩化、酒类澄清;洗涤工业:酶洗衣粉、洗衣液等也有应用。
贮存和使用
干粉条件下有效期为24个月,液态时—20℃保存12个月。客户利用缓冲液溶解后,需要—20℃贮存。溶解后,最好分装成若干份,方便使用,避免反复冻溶。如果需要在2-8℃环境下放置,超过三天,建议过滤除菌或加入抑菌剂如3%叠氮化钠,防止微生物污染。
孵育温度为55至65℃,理想孵育温度为58℃,孵育时间为15分钟至48小时;理想孵育时间为2小时。